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粪菌的提取和冻存方法?

收集人类粪便样品时,粪尿分离,以截面方式取样,迅速置入装有粪菌保护液的收集管,密封;震荡摇散摇匀;尽快使用冰袋降温;转移到厌氧环境,生理盐水稀释粪便悬液后,依次通过无菌100目尼龙网和无菌200目尼龙网去除食物残渣,滤出液4000 xg,4℃离心10 min,弃上清,用初始体积的5倍体积的菌群保护液重悬菌体,分装至冻存管;以上操作控制在6小时内;分装的粪菌-20℃冻存4小时后,转移到-80℃冻存。菌群保护液:生理盐水含50%甘油,0.1% L-半胱氨酸。


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