(1)细胞株自身的成瘤性:不同细胞株的成瘤快慢会有差异,建议正式实验之前摸索细胞株成瘤性或参考已发文献;
(2)细胞接种时的状态及活率:建议取处于对数期生长的细胞进行接种,避免体外过度传代影响细胞状态,接种前对细胞活率进行检测;
(3)支原体污染:建议接种前对细胞进行支原体检测;
(4)接种的剂量:不同的细胞系、不同的小鼠周龄和接种位置所需要的细胞剂量会有差异,建议正式实验之前摸索出最佳细胞注射剂量;
(5)接种方式:常用的接种部位有皮下、尾静脉和原位。建议根据细胞株成瘤性和实验目的选择合适的接种部位;
(6)选择的免疫缺陷小鼠:不同免疫缺陷程度的小鼠或不同周龄小鼠的成瘤速度有所差异,建议根据预实验结果选择合适的动物模型;
(7)其他辅助因子:根据细胞株类型选择实验中是否需要添加辅助因子;
(8)适应性饲养:小鼠在运输过程中会产生应激反应,使小鼠出现一系列的病理生理学变化,这些变化会增加某些实验误差,因此在接到动物后应尽量避免立即进行实验,建议让动物有1~2周的适应期。
荷瘤实验是否成功受很多因素的影响,以上建议仅供参考。另外,个体差异和肿瘤生长的速度不完全同步,实验中建议适当增加小鼠的富余量。
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