近日，岸迈生物ROR1/CD3双抗—EMB-07注射液临床试验申请获得NMPA受理，这也是国内首款申报临床的ROR1/CD3双抗。

新兴靶点ROR1跨膜蛋白结构构成：

ROR1（Receptor tyrosine kinase-like orphan receptor1）是一种Ⅰ型跨膜蛋白，属于受体酪氨酸激酶样孤儿受体（ROR家族）。ROR1与配体Wnt5a结合，主要介导非经典Wnt通路的信号传递，与多种细胞生理过程和多种癌症的发生发展密切相关。ROR1是单次跨膜受体，主要由胞外区（免疫球蛋白样结构域-IG，卷曲结构域-FZD及环状结构域-KD）、跨膜区和胞内结构域（酪氨酸激酶样结构域-TKD、丝氨酸/苏氨酸结构域-S/T和脯氨酸结构域-PKD）三部分组成。

图1：ROR1结构图示（来源Zhao Yuming, Front Oncol, 2021[1]）

研究表明，肿瘤细胞中ROR1的高表达有助于提高肿瘤细胞的存活率、增殖、迁移和趋化

在儿童和成人阶段，ROR1在正常组织中表达量很低或几乎不表达，但在多种实体瘤和血液瘤中却存在差异化的高度表达，如血液瘤慢性淋巴细胞白血病、实体瘤乳腺癌、肺癌、结直肠癌和黑色素瘤等，这种表达特性使该蛋白成为癌症治疗的理想药物靶点。研究表明，肿瘤细胞中ROR1的高表达有助于提高肿瘤细胞的存活率、增殖、迁移和趋化。表达ROR1的血液和实体肿瘤具有很高的自我更新潜力，表现出更高的生存率和迁移率，并与不良预后相关。

图2：ROR1-Wnt5a信号调节机制（来源Karvonen Hanna. Cells, 2019[2]）

注：( A ) Wnt5a与 ROR1 的结合诱导细胞内信号传导，导致 AKT 激活增加，反过来 使BMI-1 磷酸化以促进基因组不稳定、癌细胞增殖和耐药性。( B ) Wnt5a 与 ROR1/FZD 复合物结合通过 G α12/13激活 RhoA，从而抑制 Lats1/2 活性、抑制 YAP/TAZ 去磷酸化和核转位。

ROR1靶点药物研究现状：全球范围内已公布共有20个

ROR1凭借其在肿瘤细胞与正常组织上的差异化表达特性，一度成为肿瘤治疗中炙手可热的新兴靶点，各大药企纷纷布局管线。

截至到目前，全球范围内已公布的靶向ROR1的药物共有20个。其中国内企业基石药业在2020年从LegoChem引进ROR1抗体偶联药物LCB71；同年，默沙东宣布将以27.5亿美元收购VelosBio，其核心产品即ROR1ADC药物VLS101。目前已开发的靶向ROR1抗癌疗法，包括单克隆抗体、抗体偶联药物、双特异性抗体、以及CAR-T疗法等多种治疗模式,部分药物已进入临床阶段，未来一段时间或将迎来ROR1药物上市热潮。

表1：部分ROR1靶点药物研发进度（全球），数据来源于医药魔方

ROR1可作为双抗研发靶点

除了ROR1的单抗类药物研发，ROR1/CD3双特异性抗体亦有布局。双特异性抗体（bsAb）是指具有两个不同的抗原结合位点，可同时结合两个靶抗原或结合同一抗原的两个不同表位的一类抗体，该类抗体具备双向靶向功能，在某种程度上可实现1+1>2的功效。目前已公开的bsAb的已多达100多种，其中靶向CD3的抗体接近50%。

以NovalGen的在研antiROR1/CD3双抗（NVG-111）为例，NVG-111是一种新型人源化、串联单链可变片段ROR1×CD3 BiTE，通过与ROR1膜近端卷曲结构域中的膜近端表位结合并重定向T细胞活性，引发强效肿瘤杀伤作用。跟据最新临床数据表明，NVG-111在复发/难治性慢性淋巴细胞白血病(R/RCLL) 或套细胞淋巴瘤(MCL)患者治疗中表现安全可管理且有前景的缓解。

图3：NVG-111抗体结构

人源化ROR1小鼠，广泛用于双特异性抗体相关药物筛选

集萃药康致力于基因编辑小鼠模型领域，可提供人源化ROR1小鼠模型—BALB/c-hROR1（T054199），通过与BALB/c-hCD3E配繁可构建双靶点小鼠模型，广泛用于双特异性抗体相关药物筛选、评价及临床前安全性评价应用等。

人ROR1 mRNA表达检测

图4：BALB/c-hROR1小鼠中可成功表达hROR1

CT26-hROR1(Tg)-mROR1(KO) 细胞系成瘤验证

图5：CT26-hROR1细胞系成瘤曲线

结果显示：将CT26-hROR1(Tg)-mROR1(KO)细胞系接种于BALB/c背景小鼠，肿瘤生长一致性较好。

参考资料

【1】YumingZhao,DengyangZhang,etal.TyrosineKinase ROR1 as a Target for Anti-Cancer Therapies.FrontOncol. 2021May 28;11:680834.

【2】HannaKarvonen,HarlanBarker,et al.Molecular Mechanisms Associated with ROR1-MediatedDrug Resistance: Crosstalk with Hippo-YAP/TAZ and BMI-1Pathways.Cells. 2019 Aug 2;8(8):812.

【3】https://mp.weixin.qq.com/s/qdhebOLx-DIxqzTf2lFhCQ