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焦虑小鼠模型的建立

 焦虑动物模型就是将动物置于一系列应激性情境中(潜在的或实际的威胁,急性的或慢性的),使其产生情绪障碍,然后应用特定的手段来对行为和生理指标进行检测,从而探讨此情绪障碍的深入机制,以及鉴定和筛选抗焦虑药。

  焦虑小鼠模型两种构建方法:

  一、社会应激导致动物焦虑模型

  1.造模材料

  动物:大鼠。

  2.造模方法

  实验大鼠至少受到一次攻击,并且表现出驯服的姿势,如防御性直立、仰卧、静止不动等。为了控制应激强度,严格规定应激时间,在第一次攻击发生后实验持续8min,允许10min作为攻击潜伏期。笼中设有金属栅栏,以防止严重的躯体损伤。

  高架十字迷宫:该迷宫反映动物的焦虑情绪。该迷宫包括两条开放臂(50cm×10cm)和两条闭合臂(50cm×10cm×40cm),在中央区(10cm×10cm)联结。两位观察者分别观察每组50%的动物。将大鼠从中央格面向闭合臂放入迷宫,记录其5min内的活动情况。观察指标:闭合臂进入次数(必须有两只前爪进入臂内);开放臂进入次数;闭合臂停留时间;开放臂停留时间。

  3.造模原理

  社会应激导致动物焦虑。

  4.造模后的变化

  高架十字迷宫行为检测:与对照组相比,造模组大鼠在高架十字迷宫开放臂停留的时间、开放臂时间占两种臂进入时间总和的百分比及大鼠进入高架十字迷宫开放臂的次数(用开放臂进入次数占两种臂进入次数总和的百分比)均显著减少。

  二、氯苯哌嗪诱导大鼠焦虑模型

  1.造模材料

  动物:健康ddy小鼠,雄性,4周龄;药物:氯苯哌嗪(m-chlorophe-nylpipera-zine, mCPP);

  器械:动物活动记录器。明暗箱。

  2.造模方法

  首先将ddy小鼠置于实验环境适应12~24h。实验操作从上午10时到下午3时。将动物皮下注射mCPP 1~2mg/kg,对照组皮下注射生理盐水。20min后将动物分别放于明暗箱的中央,记录5min内各组小鼠在明箱和暗箱中的活动次数。

  3.造模原理

  mCPP造成动物的脑内5-HT递质系统发生变化,诱导大鼠焦虑模型。

  4.造模后一般变化

  与对照组比较,造模组ddy小鼠在明箱的活动次数显著减少。

  如何判断焦虑模型是否建立成功?

研究发现,当机体内缺乏gABA时,会产生焦虑、不安、疲倦、忧虑等情绪。谷氨酸(Glu)是中枢神经系统内含量最高,作用最广泛的兴奋性氨基酸,涉及脑内的很多重要生理功能。因此,脑中gABA和Glu的表达情况可作为判断的标准之一。

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