转基因（Transgene，TG）是利用转基因技术，将外源性基因（重组DNA片段）导入到生物体的基因组中，达到改造生物体基因组的目的。从上个世纪80年代起，Jaenisch等学者尝试将环形SV40 DNA（病毒基因组）导入到小鼠体内；到90年代Gordon等人首次通过原核注射将外源性DNA导入小鼠的受精卵中，并得到可遗传的转基因子代小鼠。自此以后，转基因技术被成功的应用到各种生物体上，由于转基因模型制作周期短、成本低，受到了广大科研工作者的青睐。

转基因小鼠制备类型与流程图

转基因小鼠的制作类型根据不同的表达方式划分为：常规TG、BAC-TG、可诱导型的TG（Cre/Loxp，四环素诱导，他莫昔芬诱导等）。转基因模型一般的构建策略和制作流程如下图所示：

您可以根据自身课题的实际需要来选择制作类型，以得到更加符合实验需要的理想模型。但是转基因 DNA 片段整合到基因组上是随机的，这种随机整合主要表现在三个方面。

转基因小鼠繁育三种随机构建表现：

一是在基因组上整合的位置随机； 

二是单个整合位点上的拷贝数随机，有可能是单拷贝，也有可能是多拷贝；

三是整合的位点数随机，可能是单位点整合，也可能是多位点整合。

因此每一只转基因首建鼠都需要作为一个单独的种系（line）进行繁育和研究。那么，转基因小鼠繁育的重中之重就是繁育建系和筛选工作。

转基因小鼠繁育筛选：

一般转基因模型制作会得到3-5只F0代 Founder鼠（首建鼠），也就是3-5条line，这么多的转基因Founder鼠该如何进行繁育建系的呢？这些Founder鼠可以互配吗？这些Founder鼠是不是都需要进行繁育呢？它们是一样的吗？小编帮你一一解答，不要急哦~

虽然最初导入受精卵的基因是相同的，但是得到的每一只F0代 Founder鼠都是不一样的，都有不同的表达情况，都是独立的line，所以每只Founder鼠需要单独繁育建系，不能互配。如果经费充足的话，建议每只Founder鼠都进行繁育建系，毕竟每只鼠都是不一样的。

当然，如果您一不小心将Founder鼠互配，后代一般情况下还是可以进行分离的，但是却造成了不必要的时间和精力浪费，所以我们一定不要认为将不同的Founder鼠互配可以节约时间，反而大大增加了筛选的时间；另外Founder鼠互配也有可能导致小鼠不育等异常表型。

转基因小鼠建系和筛选鉴定步骤：

1、首先，等待每只Founder小鼠性成熟（雄鼠8周龄，雌鼠6周龄）后，不同的line分别与背景鼠进行合笼配繁，每条line得到的F1代小鼠5-7天剪尾进行PCR鉴定基因型；

2、然后根据基因型结果统计F1代小鼠阳性率，淘汰掉不能繁育或者不能遗传的line（不是所有的line都能繁育和遗传的哦）；

3、阳性F1代小鼠性成熟后分别与背景鼠配繁，对得到的N2代小鼠进行5-7天剪尾进行PCR鉴定基因型，然后根据基因型结果统计N2代小鼠阳性率，若阳性率≈50%，可认为建系成功，建议每代统计至少15只后代鼠。

4、转基因小鼠建系成功后，需要分别选取繁育建系成功后的同窝或同批某条Line小鼠中数只阳性小鼠和数只阴性小鼠做表达检测（一般选择N2代）。若阳性小鼠检测结果符合表达预期，则说明该转基因小鼠模型构建成功。

转基因技术建系成功的小鼠是如何进行繁育保种的呢？

建议采取将不同line转基因阳性的小鼠配背景鼠的方式分别进行繁育保种，不建议采用阳性配阳性的方式进行繁育，因为转基因是随机插入的形式制作的，阳性是纯合的话可能会导致小鼠具有不确定的表型。

现在，您是不是对转基因小鼠模型有了一个全新的认识呢？以后拿到转基因小鼠对如何进行繁育保种也能得心应手了。如果您在繁育过程中遇到任何问题，可以联系江苏集萃药康生物科技有限公司代理繁育部门，会有专业的人士为您解答的。同时也可以给您提供专业的代理繁育服务。