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cas9是一种什么酶?CRISPR/Cas9基因敲除技术

cas9是什么酶?

  核酸内切酶!Cas9核酸酶(CRISPR相关蛋白9)是一种RNA引导的核酸内切酶,用于通过产生序列特异性双链断裂(DSB)进行基因组编辑。DNA中DSB的存在导致细胞修复过程的激活,其中DNA恢复通过非同源末端连接(NHEJ)或同源定向重组(HDR)发生,从而改变基因组。基因敲低、缺失或插入说明了CRISPR/Cas9系统的主要成就。

  cas9基因编辑技术:

  基因组编辑(Genome Editing)又称基因编辑,是基因工程的一种,指在活体基因组中进行DNA插入、删除、修改或替换的一项技术。其中,CRISPR/Cas9技术是目前基因编辑领域内应用最广的技术。

  什么是CRISPR/Cas9技术?

  CRISPR (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats, 规律间隔成簇短回文重复序列),是存在于细菌和古菌基因组内的⼀段重复序列。

  Cas (CRISPR-associated, CRISPR关联)蛋⽩,由总是出现在CRISPR区域附近的CRISPR关联基因编码的蛋白。Cas9是其中一种核酸内切酶,即能从核酸的内部切开双链的酶。

  在自然界中,CRISPR/Cas系统能为细菌和古⽣菌提供对病毒和质粒的适应性免疫。现在,科学家通过对这个系统的重新设计和编程,可以精确识别并切断目标DNA,并诱导细胞进行DNA修复,最终实现基因敲除和基因修改。


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  集萃药康CRISPR/Cas9技术基因编辑服务:

  CRISPR/Cas9是一种通过Cas9/gRNA复合物对靶基因位点进行切割诱导DNA修复的方式实现特定基因修饰的基因编辑技术。CRISPR/Cas9是目前最常用的基因编辑技术,相对于其他技术(TALEN、ZFN、ES技术)有简单,快速,成本低等优点,目前GPTech每年CRISPR/Cas9技术构建小鼠模型通量超6000例,并且还在不断增加中,构建能力位于世界前列。通过CRISPR/Cas9技术制作KO、CKO、KI、PM基因编辑小鼠详情介绍如下:

  1、基因敲除(Cas9 KO)

  

CRISPR/Cas9 KO策略示意图

  2、条件性基因敲除(Cas9 CKO)

CRISPR/Cas9 cKO策略示意图

 3、基因敲入(Cas9-KI)

CRISPR/Cas9 KI策略示意图

  4、点突变(Cas9-PM)

  

CRISPR/Cas9 PM策略示意图

  扩展阅读:“剪”得断,理不乱| CRISPR/Cas9技术简史(上)https://www.bioon.com.cn/sub/showarticle.asp?newsid=99881

 

  参考文献

[美] 詹尼佛·A.杜德娜、[美]塞缪尔·H·斯坦伯格. 破天机——基因编辑及其控制演化的惊人力量[M]. 湖南: 湖南科学技术出版社, 2020.

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