HT29 是来源于人的结肠癌细胞系，经皮下成瘤检测实验表明该细胞系在皮下接种后，能正常成瘤。
l 细胞名称：HT-29(人结肠癌细胞)(STR鉴定正确)
l 细胞别称：HT 29; HT29
l 来源：结肠腺癌;女性
l 细胞形态：上皮细胞样
l 细胞类型：肿瘤细胞
l 生长特性：贴壁细胞
l 培养条件：McCoy’s 5a+10% FBS+1% P/S
l 培养环境：空气，95% ; 二氧化碳 (CO2)，5%
l 细胞简介：HT-29细胞是由J·Fogh在1964年用移植培养方法从一名44岁白人女性结肠直肠癌患者的原发肿瘤中分离出来，在和含15S的F12培养液中培养。近来，已建株的HT-29细胞用含10%血清McCoy's5A培液培养。HT-29细胞在裸鼠中致瘤，也能在类固醇处理的地鼠中致瘤。HT-29细胞合成IgA、CEA、TGFβ结合蛋白和黏液素等;表达尿激酶受体，但没有检测到血浆酶原活性;不表达CD4，但细胞表面表达半乳糖神经酰胺(HIV的可能替代受体)。HT-29细胞的超微结构特征包括微绒毛、微丝、带有深色颗粒的大空泡线粒体、带有游离核糖体的光滑粗面内质网、脂滴、少量初级溶酶体和许多次级溶酶体。细胞表达尿激酶受体，但不具有可检测的纤溶酶原激活活性。HT-29细胞CD4呈阴性，但细胞表面存在半乳糖神经酰胺(一种可能的HIV替代受体)的表达。HT-29细胞c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis和fos癌基因表达阳性，但未检测到N-myc癌基因表达，p53抗原过度产生，p53基因的密码子273存在G->a突变，导致Arg->His取代。HT-29细胞可以用于3D细胞培养、高通量筛选、癌症研究和毒理学研究，也是一种合适的转染宿主。
换液周期：2-3天
培养基体积：T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
传代比例：1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)
传代方法：
1. 尽量吸干净T25瓶原培养基;
2. 加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS;
3. T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;
4. 将培养瓶放入37度培养箱消化;
5. 消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;
6. 混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清;
7. 加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里;
8. 补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养;
注意事项：
l 不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间
l 消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。
>>>集萃药康拥有丰富的细胞系资源，包括基因编辑细胞系、报告基因细胞系、人源化肿瘤细胞系、CDX细胞系等。
冻存液配方：92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格：200-300万/ml，1ml每管
冻存方法
1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存
注意事项：冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案
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