转基因鼠模型建立方法,目前常用的大概有如下几种:最常用的是显微注射法;另外还有逆病毒转染法;畸胎瘤细胞植入法;精子转移法及定点整合法(即基因打靶)。
主要常用于单纯基因转基因小鼠模型的制备。
其优点是任何DNA都可以直接导入受精卵原核内,而导入的外源基因整合进入基因组,整合性进入宿主基因组的效率较高。外源基因在卵裂前就整合到受体的染色体上,并且单纯转基因小鼠的制备实验过程相对简单,实验周期也较短。
主要缺点是常出现宿主DNA序列的重排、缺失、重复或者异位。因为随机整合到基因组当中,可能对某些正常的基因有干扰。另外,其表达水平在个体间常不稳定。有时可能被宿主遗传防护机制剔除。另外,建立单纯转基因小鼠的设备相对也比较昂贵,操作者要求有较高的技术操作水平。
转基因小鼠广义上指在基因组中稳定的整合了外源DNA的小鼠。狭义的转基因小鼠是指基因组中稳定的整合导入外源基因,其能通过生殖细胞遗传给下一代的小鼠。
建立转基因小鼠模型目的,主要是通过阻止、改变或增加特定基因在小鼠体内的表达,来研究基因结构与功能,建立人类疾病的动物模型,研究各种药物的作用机制及药效学,并且可以生产生物活性药品,如人类血液因子等重要蛋白质来治疗某些疾病。
用转基因鼠模型研究人类疾病的优点
用转基因鼠模型研究人类疾病的优点,主要有小鼠与人类在生理学方面比较类似,小鼠突变表型接近人类遗传病的表型,小鼠基因与人类基因相似度可达99%;小鼠基因组序列和连锁图已比较清晰:小鼠的遗传背景比较稳定;并且小鼠繁殖速度快,每窝产仔多,使用于做对照。