抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)为破骨细胞的特异性标志酶，对骨组织进行抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色可以了解破骨细胞的骨吸收情况。

　　trap染色作用：TRAP染色什么细胞

　　Trap染色是用于检测骨组织、骨细胞中特征物质的染色，使破骨细胞呈红色，背景呈绿色或蓝色。抗酒石酸酸性磷酸酶(Trap)为破骨细胞的标志酶，特异地分布于破骨细胞中，为破骨细胞所特有，通常作为鉴别破骨细胞的重要标志物。在含酒石酸的酸性条件下，trap能将萘酚AS-BI磷酸盐水解，产生的萘酚AS-BI立即与fast red或六偶氮副品红结合，在酶活性部位形成不溶性的红色染料，通过观察红色染料的形成可间接了解酸性磷酸酶的活性，进一步鉴别及分析破骨细胞的状态。

　　Trap的染色工作液配置方法：

　　1、取B液50ul与C液50ul在离心管混合均匀，为副品红溶液。

　　2、在上述100ul副品红溶液中加入100ul D溶液，混合均匀。

　　3、取A液1.8ml于上述混合液中，充分混匀。

　　4、混匀后经针式滤器过滤，则得到trap工作液。

　　备注：务必按照所属顺序配制工作液。注意工作液为现配现用。

　　Trap的染色步骤：

　　1. 石蜡切片常规脱蜡至水(冰冻切片省略这步)

　　2. 切片于纯水洗5分钟

　　3. 用组化笔在切片组织上画圈后，置于盛有纯水的湿盒中，用纯水37℃孵育2h。

　　4. 倒去组织上纯水后，切片重新放入湿盒，滴加现配过滤好的trap工作液完全覆盖于切片组织上，放于37℃烤箱避光染色20-30 min。

　　5. 倾去染液，水轻洗玻片

　　6. Mayer苏木素染液液滴染(浸染)1-2min，水洗。(此步骤为染核，可自选)

　　7. 切片经3缸无水乙醇，每缸5min → 直接放入 2缸二甲苯，每缸5min透明后，滴加中性树胶封片剂封片。

　　trap染色结果判读：

　　破骨细胞呈酒红色，细胞核呈蓝色。

　　trap染色注意事项：

　　1、试剂配制的过程中，各个试剂的PH值一定要准确，PH不准会导致酶不能被有效激活，导致染色结果不佳。

　　2、亚硝酸Na溶液不稳定，容易被氧化，在使用时避免带入杂质，并且为了确保染色结果，最好一到两个星期更换一次。

　　3、染trap的骨组织最好用EDTA脱钙，用酸脱钙的组织切片trap为阴性。

　　4、D染液存放温度为-20℃，trap工作液为现配现用，提前估计好每次用量。