基因编辑小鼠:利用基因编辑的方法改变小鼠目的基因片段,实现对特定基因片段进行敲除,引入突变或外源基因等,从而获得基因修饰的小鼠,主要分为基因敲除(KO)、基因敲入(KI)、条件性敲除小鼠(CKO)等。
基因修饰小鼠制备常用技术介绍:
集萃药康拥有成熟的CRISPR/Cas9、TALEN、ZFN、ES等基因编辑技术,可构建转基因、基因敲除、基因敲入等各类基因编辑小鼠模型。目前集萃药康已完成了上万例基因编辑小鼠模型制作,现每年可完成超5000例模型构建,为客户提供现货模型产品,模型定制、联合研发等服务。
CRISPR/Cas9是2013年出现的一种由RNA指导Cas核酸酶对靶向基因进行特定DNA修饰的技术。在这一系统中,crRNA(CRISPR-derived RNA)通过碱基配对与tracrRNA(trans-activating RNA)结合形成双链RNA,此tracrRNA/crRNA二元复合体指导Cas9蛋白在crRNA引导序列靶定位点剪切双链DNA达到对基因组DNA进行修饰的目的。
技术优势
高质量:执行最严格质控标准,首创Realtime PCR检测,0随机插入,0串联重组
高效率:集萃药康优化高效的基因编辑平台,一次成功率高,交付周期更短
多修饰:靶基因多位点或多个基因同时敲除,成功操作超长打靶片段23Mbps
多背景:C57BL/6J、C57BL/6N、NOD/LTJ、NCG、BALB/C、FVB、C57BL/10J等
CRISPR/Cas9基因编辑小鼠培育方法
1、基因敲除(Cas9 KO)
CRISPR/Cas9 KO 策略示意图
2、条件性基因敲除(Cas9 CKO)
CRISPR/Cas9 CKO 策略示意图
3、基因敲入/突变(Cas9-KI、Cas9-PM)
H11/Rosa26 KI策略示意图
CRISPR/Cas9 KI 策略示意图
CRISPR/Cas9 TM 策略示意图