第一行是flox鼠,一个纯合子。蓝色的方框就是你准备敲除的目标基因,目标基因的两侧都锚定了loxp序列;
第二行是cre鼠,红色的方框是cre酶的基因,它前面有一个启动子,这个启动子一般是特异性的,可以在特定的时间或特定的组织内表达。比如说研究的结肠成纤维细胞,那么选定的启动子是VI型胶原蛋白启动子。
flox鼠和cre鼠进行杂交,生成目标鼠,在目标鼠的结肠成纤维细胞中,VI型胶原蛋白基因进行表达,其后的cre酶基因同时表达,cre酶识别loxp序列后,对相应序列进行删除或重组,这张图上因loxp序列位于同一DNA链上且方向相同,所以删除了目标基因(蓝色方框),达到了在结肠成纤维细胞中特异性敲除目标基因的目的。点击进入集萃药康cre工具鼠商城
基因敲除是自80年代末发展起来的,利用小鼠胚胎干细胞的高重组效率将基因敲除或敲入的一种新型分子生物学技术。
通常意义上的基因敲除主要是应用DMA同源重组原理,用设计的同源片段替代靶基因片段,从而达到基因敲除的目的。
l可以制作胚胎致死型基因的基因敲除小鼠
l用于目的基因在特定组织或细胞中的功能性研究
l通过其他诱导系统控制Cre或Flp启动子的表达,还可以实现在时空上控制基因敲除的发生