细胞凋亡的概念：

细胞凋亡，也称为细胞程序性死亡，是指为了维持机体内环境的稳定，机体的细胞在基因的控制下，出现了有序的死亡，这样可以保持机体内环境的稳定，细胞凋亡的过程包括基因的激活、表达、以及调控等等，是一种主动的死亡过程，就像是植物的自然凋亡一样，所以称为细胞凋亡。细胞凋亡与细胞坏死有明显的区别，细胞坏死是病理情况下的被动死亡，会导致各种病理变化。

　　细胞凋亡与细胞死亡的区别

　　细胞凋亡与坏死的区别

　　目前认为，细胞坏死与凋亡的形态改变不同，坏死表现为细胞肿大，细胞器肿胀、破坏，细胞核早期无变化，晚期染色质破碎断裂成许多不规则的小凝块，呈簇状，胞膜破裂，胞内容物释放，诱发炎症反应。坏死是成群的细胞死亡，而凋亡一般是单个细胞的死亡，无炎性反应。

　　细胞凋亡的检测方法

　　细胞处于不同的凋亡阶段需要找到不同的特点，配以合适的检测工具就能准确解读细胞凋亡的密码。凋亡的细胞具有不同的生物学特征，典型的特征包括：1)细胞膜PS(磷脂酰丝氨酸)外翻;2)线粒体膜电位丧失;3)细胞核浓缩和断裂

　　1、凋亡早期检测方法

　　在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸(Phosphotidylserine, PS)位于细胞膜内侧，但在早期凋亡的细胞中，PS由细胞膜的内侧翻转到细胞膜表面，暴露在细胞外环境中。Annexin-Ⅴ(膜联蛋白-V)是一种分子量为35-36 kDa的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力结合，通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。将 Annexin-V 与 PI 匹配使用，就可以将凋亡早晚期的细胞以及死细胞区分开来。

　　2、线粒体膜电位变化的检测方法

　　线粒体膜电位(△Ψm )的丢失导致线粒体膜中线粒体通透性转换孔的开放，细胞色素C(Cytochrome C)被释放到细胞浆中，致使Caspase被激活从而诱导细胞凋亡。JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位(△Ψm )的理想荧光探针，表现出电势依赖性的积聚在线粒体内。正常线粒体内，JC-1聚集在线粒体基质中形成聚合物，聚合物发出强烈的红色荧光;而在凋亡细胞中，线粒体跨膜电位去极化，JC-1从线粒体内释放，浓度降低，逆转为发射绿色荧光的单体形式。因此颜色的变化将直接反映出线粒体膜电位的变化。

　　3、凋亡晚期检测方法

　　细胞凋亡晚期，染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3’-OH末端，可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下，将荧光素/酶标记的dUTP结合到DNA的3’--OH末端，从而可进行凋亡细胞的检测，这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal -deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling，TUNEL)

　　细胞凋亡的形态变化

　　电镜下细胞凋亡的形态学变化是多阶段的，可分为

　　①细胞浆浓缩，核糖体、线粒体等聚集，细胞体积缩小，结构更加紧密;

　　②染色质逐渐凝聚成新月状附于核膜周边，嗜碱性增强。细胞核固缩呈均一的致密物，进而断裂为大小不一的片段;

　　③胞膜不断出芽、脱落，细胞变成数个大小不等的由胞膜包裹的凋亡小体(apoptotic bodies)。凋亡小体内可含细胞浆、细胞器和核碎片，有的不含核碎片;

　　④凋亡小体被具有吞噬功能的细胞如巨噬细胞、上皮细胞等吞噬、降解;

　　⑤凋亡发生过程中，细胞膜保持完整，细胞内容物不释放出来，所以不引起炎症反应。