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小鼠乳腺癌4t1细胞的培养笔记

 4T1细胞是从410.4瘤株中未经诱变筛得的6-硫鸟嘌噙抗性细胞株。当4T1细胞注射到BALB/c小鼠

中时,4T1细胞会自发产生高转移肿瘤,可转移到肺、肝、淋巴结和大脑,同时在注射部位形成始发灶,诱导转移时不需要摘除始发灶。4T1细胞在BALB/c小鼠中的生长与转移特性与人体中的乳腺癌十分相近,这种肿瘤是人Ⅵ期乳腺癌的动物模型

  4T1乳腺癌细胞培养观察日记:

  最近养了4T1乳腺癌细胞,发现这个细胞还是很有个性的。

  细胞状态好的时候生长特别旺盛,代谢很快,所以养这个细胞需要勤快,基本上每天都需要操作,一般是一天换液,第二天传代,在50%以上就可以传代了,1传3-4都可以,稍微长的太满达到80%以上,接下来传代后的状态就有影响。

  细胞贴壁比较牢固,我开始用5%胰酶消化3分钟后,用完全培养基终止消化,吹打不下来。延长消化时间后发现传代后的细胞状态很差。所以可以在37℃消化3分钟后用胰酶液吹下来后在加培养基终止。

  还有就是这个细胞很容易出现培养瓶边缘角落消化不完全出现累计的现象,这一部分出现凋亡会影响到整个培养瓶的细胞状态。

  此段培养笔记来源丁香园论坛用户:Raoqi92

  小鼠乳腺癌培养操作步骤

  1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;

  2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);

  3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;

  4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;

  5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。

  小鼠乳腺癌4T1细胞培养的现实意义:

  1.生物技术方面:如狂犬病、小儿麻痹等。

  2.症等病毒疫苗,表皮生长因子及干扰素、白细胞介素等生长因子及单克隆抗体等。

  3.科学研究方面:主要应用于病毒学、免疫学、遗传学、肿瘤学等方面。

4.临床医学方面:胎儿的遗传性疾病分析,药物筛选及某些疾病的治疗等。


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